? ? ?選擇分離平板已經(jīng)介紹了兩個(gè),但是情況還是很復(fù)雜,對(duì)么?莫怕莫怕,最厲害的今天出場(chǎng)!
今有佳人沙顯氏,
一舞劍器動(dòng)四方。
觀者如山色沮喪,
天地為之久低昂。
HE瓊脂是中等選擇性培養(yǎng)基,其選擇性主要是三種糖,分別是乳糖、蔗糖和水楊素。沙門(mén)氏菌大部分都不利用水楊素,所以它起到和XLD瓊脂中木糖類(lèi)似的作用。而高含量的乳糖利于讓腸道中發(fā)酵乳糖遲緩的菌產(chǎn)酸,方便與沙門(mén)氏菌區(qū)分。具體原理可以參考陸橋官網(wǎng)HE瓊脂。
培養(yǎng)基配制時(shí)不需要高壓滅菌,不宜過(guò)度加熱。
國(guó)標(biāo)上描寫(xiě)的HE瓊脂上沙門(mén)氏菌菌落特征是:藍(lán)綠色或藍(lán)色,多數(shù)菌落中心黑色或幾乎全黑色;有些菌株為黃色,中心黑色或呈現(xiàn)全部黑色。
與XLD瓊脂類(lèi)似,前半段是典型沙門(mén)氏菌的菌落特征,包括了兩種主要的形態(tài)。后半段是非典型沙門(mén)氏菌的菌落特征。下面還是給大家展示一些實(shí)例,幫助大家在檢驗(yàn)中分辨沙門(mén)氏菌。
藍(lán)綠色或藍(lán)色,多數(shù)菌落中心黑色或幾乎全黑色。
1.2
典型沙門(mén)氏菌形態(tài)的干擾菌
? ??有些菌株為黃色,中心黑色或呈現(xiàn)全部黑色。
1.4
非典型沙門(mén)氏菌形態(tài)的干擾菌
從上述菌落特征可以發(fā)現(xiàn),HE瓊脂與XLD瓊脂的情況極為相似,這里不做贅述。
上述三種培養(yǎng)基是傳統(tǒng)的沙門(mén)氏菌選擇培養(yǎng)基,基本上都是基于一些生化指標(biāo)來(lái)區(qū)分菌株,例如是否產(chǎn)硫化氫,是否利用某種糖醇。這些指標(biāo)的準(zhǔn)確性相對(duì)比較高,但是存在一些干擾菌,會(huì)形成與沙門(mén)氏菌類(lèi)似的菌落形態(tài),從而影響我們的判斷。下面我來(lái)介紹一種非傳統(tǒng)原理的培養(yǎng)基。
沙門(mén)氏菌顯色培養(yǎng)基是國(guó)標(biāo)上的第四種培養(yǎng)基,是利用酶底物法,而非傳統(tǒng)生化法,對(duì)菌進(jìn)行區(qū)分的培養(yǎng)基。酶與底物的結(jié)合具有特異性,所以篩選的準(zhǔn)確性更高。再把底物連上顯色基團(tuán),從而使菌落著色,利于肉眼直接觀察酶與底物是否結(jié)合。具體原理可以參考陸橋官網(wǎng)沙門(mén)氏菌顯色培養(yǎng)基。
國(guó)標(biāo)上沒(méi)有明確寫(xiě)沙門(mén)氏菌在顯色培養(yǎng)基上的菌落特征,因?yàn)椴煌瑥S家用的酶底物和顯色基團(tuán)不同,最后形成的菌落特征就不同。以北京陸橋的沙門(mén)顯色培養(yǎng)基為例。
我們還把之前用的菌株接種沙門(mén)顯色培養(yǎng)基,具體情況如下:
? ??? 紫紅色菌落
? ? ? 藍(lán)綠色菌落和無(wú)色菌落
從上述菌落特征可以發(fā)現(xiàn),雜菌的干擾大大降低了。在不同傳統(tǒng)平板上,只有鼠傷寒沙門(mén)氏菌始終是最典型的菌落特征。腸炎沙門(mén)氏菌、傷寒沙門(mén)氏菌和豬霍亂沙門(mén)氏菌在不同傳統(tǒng)平板上總有呈現(xiàn)非最典型的情況,而在沙門(mén)顯色培養(yǎng)基上,這三種菌都是最典型的紫紅色菌落。目前,沙門(mén)顯色培養(yǎng)基上呈紫紅色菌落以外的沙門(mén)氏菌,只有發(fā)酵乳糖的亞利桑那需要特別注意,呈藍(lán)紫色,與大腸類(lèi)的菌(藍(lán)綠色)容易混淆。傳統(tǒng)平板上極易造成干擾的奇異變形桿菌和志賀氏菌,在沙門(mén)顯色培養(yǎng)基上呈現(xiàn)無(wú)色菌落,基本不造成干擾。所以無(wú)論從哪個(gè)方面,沙門(mén)顯色培養(yǎng)基的性能都優(yōu)于傳統(tǒng)平板。
從上面四種培養(yǎng)基的介紹,大家可以看出:從理論上,三種傳統(tǒng)平板上任何一種菌落形態(tài)基本都有可能是沙門(mén)氏菌,因?yàn)樯抽T(mén)氏菌的種類(lèi)太多。沙門(mén)顯色培養(yǎng)基性能更好,一些不典型菌落特征還能直接排除。但在實(shí)際工作中如果大家把每一種菌落形態(tài)都挑取鑒定,固然漏檢風(fēng)險(xiǎn)很低,但是工作量太大。所以經(jīng)過(guò)我們上述對(duì)四種培養(yǎng)基的剖析,大家應(yīng)該明白,挑取菌落最優(yōu)的方案就是優(yōu)先挑取最典型的沙門(mén)氏菌菌落特征,之后是次典型的沙門(mén)氏菌菌落特征。如果既沒(méi)有典型的,也沒(méi)有次典型的,那么可以挑取非典型沙門(mén)氏菌菌落特征進(jìn)行鑒定。
將四種培養(yǎng)基菌落形態(tài)分類(lèi)如下:

平板的內(nèi)容就介紹這些了,希望對(duì)大家有幫助。下期將展開(kāi)生化鑒定與血清的內(nèi)容,敬請(qǐng)期待。。。。